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担体和固定液的要求及其形态结构介绍

更新时间:2021-01-26      点击次数:2644
   担体和固定液的选择一般根据所谓的“相似性原则”,即固定液的性质与被分离组分之间的某些相似性,如官能团、化学键、极性、某些化学性质等,性质相似时,两种分子间的作用力就强,被分离组分在固定液中的溶解度就大,分配系数大,因而保留时间就长;反之溶解度小,分配系数小,因而能很快流出色谱柱。
 
  担体和固定液的要求:
  1、挥发性小,操作温度下有较低蒸气压,以免流失。
 
  2、热稳定性好,操作温度下不发生分解和聚合反应,并且液体状态,保持固定液原来的特性。
 
  3、对试样有一定的溶解能力,以免被测组分被带走起不到分配作用。
 
  4、具有良好的选择性,即操作条件下,对沸点相近或者性质相似的不同物质有尽可能高的分离能力。
 
  5、化学稳定性好,不与被测组分,担体,载气发生化学反应。
 
  担体和固定液在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。固定剂对细胞核细胞外成分发生物理改变。
  固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。组织细胞固定液主要由优质PFA、磷酸盐、DEPC处理水组成,pH为7.4,适合于绝大多数组织和细胞的固定,尤其适用于与RNA有关实验,它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及RNA。