实验背景
合成的皮质类固醇,简称为DEX,其具有抗炎及抗过敏的效果,其能抑制结缔组织的增生,降低毛细血管和细胞膜的通透性,减少炎性渗出,抑制组织胺和其他毒性物质的形成与释放,能促进蛋白质转变成糖,减少糖的利用;其主要应用于各种炎症、严重感冒、传染病、过敏性疾病、风湿、休克、代谢疾病及引产,但是长期使用,容易导致水肿、低血钾、肌萎缩、骨质酥松、脱钙、病理性骨折、糖尿、幼畜sheng产停滞等。因此各国严格禁止地塞米松作为生长激素使用,同时限制此药物用于动物源性食品中,我国及欧盟规定牛奶中的地塞米松的大残留*为0.3ug/kg,日本肯定列表中的牛奶中的残留*为0.02mg/kg。 安谱实验一直密切关注动物源性食品安全,为食品安全保驾护航,本次安谱实验参考国标GB/T22978-2008《牛奶和奶粉中地塞米松残留量的测定-液相色谱串联质谱法》,在10ppb加标水平上,回收率在90%以上,重现性好,满足国标检测要求。
接下来,小编带大家走进安谱实验室
一起来学习具体检测方案吧~
一、牛奶样品处理
样品提取:
取10g样品(精确到0.01g)置于离心管中,(加标浓度:500ppb,100uL,使得上机检测浓度为10ppb),加入20ml乙腈,涡旋混匀1min,以5000r/min离心10min。取上清液至梨形瓶中,旋转(水浴45℃)减压蒸发,至体积小于5ml.待上样。
小柱操作:
SBEQ-CA0853 CNWBOND HC-C18 SPE 小柱 500mg,3mL/50PCS
活化:3mL乙腈
平衡:3mL水
上样; 全部待上样液
淋洗:用5mL水洗涤容器瓶后上小柱淋洗,淋洗完抽干小柱
洗脱:5mL乙腈
浓缩:洗脱液45℃水浴氮吹干,5mL流动相复溶后,过膜上机测试
二、仪器条件
01液相条件
色谱柱:Athena C18(2.1*100mm,1.8um)梯度设置:
time(min) | A: 0.1%甲酸水 | B: 乙腈 |
0 | 95 | 5 |
5 | 5 | 95 |
5.1 | 95 | 5 |
9 | 95 | 5 |
流速:0.2mL/min
柱温:40℃
进样量:20ul
02质谱参数
离子源:ESI
扫描方式:正离子模式
检测方式:MRM
电离电压:5000V
离子源温度:300℃
雾化温度:200℃
定性离子对(m/z)393.2/373.2;393.2/355.2
定量离子对(m/z)393.2/373.2
碰撞能:12ev
注:地塞米松在APCI上响应较低,改用ESI;并优化了流动相梯度
三、实验谱图
图1. 基质标准曲线(5、10、50ppb)
图2. 牛奶基质空白提取离子色谱图
图3. 溶剂标液(10ppb)提取离子色谱图
图4. 牛奶基质加标(10ppb)提取离子色谱图
四、实验数据
基质 | 样品名称 | 地塞米松加标回收率 | 平均值 | RSD |
牛奶 | 样品加标-01 | 95.40% | 92.75% | 4.00% |
样品加标-02 | 90.10% |
五、实验耗材