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关于液相色谱填料固定相的选择方法

更新时间:2022-06-14      点击次数:623
   液相色谱填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组份先被冲洗出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
  液相色谱填料是液相色谱技术的核心关键,应用领域广泛,并对分离纯化的结果和效率起着至关重要的作用,生产环节下游需通过分离纯化提高产品的纯度和收率,保障产品质量和稳定性;色谱/层析技术是实现分离纯化的主要方式,而色谱填料/层析介质及其工艺恰恰是影响色谱/层析效率重要的因素。
 
  液相色谱填料固定相的选择:
  (1)分离中等极性和极性较强的化合物可选择极性键合相。
  氰基键合相对双键异构体或含双键数不等的环状化合物的分离有较好的选择性。
 
  氨基键合相具有较强的氢键结合能力,对某些多官能团化合物如甾体、强心甙等有较好的分离能力;氨基键合相上的氨基能与糖类分子中的羟基产生选择性相互作用,故被广泛用于糖类的分析,但它不能用于分离羰基化合物,如甾酮、还原糖等,因为它们之间会发生反应生成Schiff碱。
 
  二醇基键合相适用于分离有机酸、甾体和蛋白质。
 
  (2)分离非极性和极性较弱的化合物可选择非极性键合相。
  利用特殊的反相色谱技术,例如反相离子抑制技术和反相离子对色谱法等,非极性键合相也可用于分离离子型或可离子化的化合物。ODS是应用较为广泛的非极性键合相,它对各种类型的化合物都有很强的适应能力。短链烷基键合相能用于极性化合物的分离,而苯基键合相适用于分离芳香化合物。